細菌呼吸鏈復合物3（bc-1 complex）活性光度法定量檢測試劑盒產品說明書

（中文版）

主要用途

  細菌呼吸鏈復合物3（bc-1 complex）活性光度法定量檢測試劑是一種旨在使用還原性合成輔酶Q同功類似物和特異性抑制劑，通過反應系統測定樣品中細胞色素C還原后峰值的增高，即采用比色法測定樣品中酶活性的*而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種野生、培養或病原性細菌膜蛋白懸液樣品的輔酶Q-細胞色素C還原酶的特異性活性檢測。產品不含污染性蛋白酶，嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定，反應優化，檢測敏感。

技術背景

細菌呼吸鏈復合物III，通常稱為輔酶Q－細胞色素C還原酶、細胞色素還原酶或bc1復合物（ubiquinol cytochrome c oxidoreductase；cytochrome reductase；bc1 complex），是細菌電子傳遞鏈的中心元素，位于革蘭氏陰性和陽性細菌（除大腸桿菌和古生菌等），包括光合成細菌的細胞膜上，為寡聚體膜蛋白復合物。細菌使用氧氣、氮、硫化物等作為終端電子受體。細菌復合物III含有三個亞單位，包括細胞色素b（Cytochrome b），細胞色素c1（cytochrome c1）和Rieske鐵硫蛋白（Rieske iron-sulfur protein），通過Q循環（Q cycle）進行催化作用。其特征性的酶活性是抗霉素敏感的輔酶Q－細胞色素C還原酶。復合物III催化氧化型細胞色素C被還原為還原型細胞色素C，細菌內電子由低電位的供體還原型泛醌（ubiquinol；UQH2）或還原型輔酶Q（reduced Coenzyme Q；CoQH₂）傳遞到細胞色素C或質體藍素（plastocyanin）上的能量轉移反應，進行呼吸鏈傳遞。細菌復合物3和復合物4的相互作用，形成泛醌氧化酶（quinol oxidase）。輔酶Q－細胞色素C還原酶反應系統測定氧化型細胞色素C的濃度變化。基于還原型泛醌或還原型輔酶Q底物，在抗霉素存在與否的情況下，通過輔酶Q-細胞色素C還原酶的催化，轉化成泛醌（ubiquinone；UQ）或輔酶Q（Coenzyme Q；CoQ），同時氧化型細胞色素C，轉化為還原型細胞色素C，在分光光度儀下產生吸光峰值的變化（550nm 波長），由此定量測定輔酶Q－細胞色素C還原酶的特異活性。其反應系統是：